Essai fluorescent à haut débit pour étudier les interactions microbe-ver

Commencez par un tube contenant des vers C. elegans .

Transférez les vers sur une plaque multipuits avec un milieu d’agarose riche en nutriments contenant soit la bactérie témoin, soit la bactérie testée.

Lors de l’incubation, les vers ingèrent des bactéries, qui colonisent l’épithélium intestinal et libèrent des acides aminés servant de source de nutriments. Ces acides aminés sont métabolisés en dérivés d’acides aminés et stockés dans des granules intestinaux liés aux lysosomes.

Ensuite, ajoutez un tampon frais et transférez les vers sur une plaque noire multipuits pour test.

Ajoutez un inducteur chimique de stress à chaque puits et scellez la plaque.

Placez la plaque dans un lecteur de plaques à fluorescence et enregistrez la fluorescence.

Chez les vers, l’inducteur de stress provoque un stress oxydatif, qui endommage les cellules épithéliales intestinales.

Cela provoque la rupture des granules intestinaux liés aux lysosomes, libérant des dérivés d’acides aminés qui, lorsqu’ils sont exposés à la lumière ultraviolette, fluorescent en bleu.

Comparez la fluorescence des vers exposés aux bactéries témoins et testez pour évaluer l’efficacité de la colonisation bactérienne et leur impact sur l