Préparation d’échantillons de Myxococcus xanthus pour l’imagerie de cellules vivantes

0 vues • 3:24 min • November 28th, 2025

Commencez par une culture de Myxococcus xanthus, une bactérie du sol à croissance lente.

Inoculez une colonie dans un milieu complété d’un antibiotique.

Les cellules ont été conçues pour résister à l’antibiotique, garantissant que seules les bactéries désirées survivent.

Transférez la suspension dans une fiole plus grande contenant le milieu et incubez en secouant pour favoriser une croissance optimale.

Prenez une gaine de couverture montée sur un cadre métallique, qui assure un support mécanique lors de l’imagerie.

Distribuez la culture bactérienne dessus, puis ajoutez des microsphères fluorescentes pour servir de points de référence à l’alignement des images tout en acquérant plusieurs images.

Placez un coussinet d’agarose pré-chauffé contenant le substrat, puis recouvertez-le d’une housse pour maintenir l’hydratation.

Incubez pour permettre aux cellules d’adhérer au coussinet d’agarose.

Le pad fournit des nutriments aux cellules, permettant l’imagerie à long terme des processus cellulaires vivants lors de la prolifération dans la bactérie à croissance lente.

Pour commencer, re-suspendez une seule colonie de M. xanthus dans 500 microlitres de CTT à 1 %, complétés d’antibiotiques, dans un

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