Essai de superposition d’agar mou pour détecter la mort médiée par bactériocine chez Pseudomonas syringae
Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
0 vues • 3:17 min • November 28th, 2025
Commencez par une agar molle en fusion maintenue à une température chaude.
Inoculez une culture de Pseudomonas syringae , la souche testée, dans l’agar.
Puis un vortex brièvement pour répartir les cellules uniformément.
Versez le mélange sur une plaque d’agar solidifiée et étalez-le uniformément.
Fermez le couvercle et laissez solidifier.
Repérez un surnageant filtré à la surface de l’agar solidifié.
Le surnageant contient de la bactériocine, une molécule antibactérienne dérivée d’une souche de donneur induite par le stress, P. syringae .
Incubez la plaque pour permettre la croissance bactérienne et la diffusion de la bactériocine à travers l’agar.
La bactériocine se lie à des récepteurs de surface spécifiques de la souche testée et perturbe sa membrane, entraînant la mort cellulaire.
Cela entraîne la formation d’une zone claire sur l’agar, indiquant la zone où la souche testée a été éliminée par la molécule antibactériocine.
Diluez la culture de 1 à 100 dans un KB frais. Faites couver la culture pendant trois à quatre heures en secouant à température ambiante. Ensuite, préparez de l’agar à l’eau stérilisée en autoclavant une suspension d’agar dans de l’eau ultra-pure.
Maintenez l’agar mou fo
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