Isolement des bactéries adaptées au stress par sélection de colonie unique

Prenez une culture bactérienne qui a été cultivée sous une condition de stress pendant une longue période.

Le stress à long terme entraîne des mutations spontanées, la sélection naturelle et la prolifération de bactéries adaptées au stress.

Pour isoler ces bactéries, placez un petit volume de la culture sur une plaque d’agar contenant le même facteur de stress et incubez.

Le facteur de stress assure la croissance uniquement des colonies bactériennes adaptées au stress.

Choisissez une seule colonie pour maintenir la pureté génétique et inoculez le milieu liquide contre le facteur de stress.

Incubez avec des secousses pour faciliter la croissance de bactéries adaptées au stress.

Utilisez un petit volume de culture pour inoculer le milieu frais avec le facteur de stress.

Simultanément, inoculez un autre milieu contenant le stresseur avec des bactéries de type sauvage ou non adaptées au stress.

Mesurez l’absorbance à intervalles réguliers comme indicateur de la croissance bactérienne.

Comparez le profil de croissance pour assurer un isolement réussi des bactéries adaptées au stress.

Préparez un milieu en plaques d’agar à 1,6 % contenant le même facteur de stress à la même concentration que dans