Enrichissement sélectif et isolement des bactéries marines dégradant le pétrole à partir d’échantillons d’eau de mer

Commencez par un échantillon d’eau de mer contenant diverses communautés microbiennes, y compris des bactéries capables de dégrader les hydrocarbures.

Effectuer des dilutions en série de l’échantillon dans du sérum physiologique pour réduire la densité microbienne.

Ajoutez du pétrole brut à de l’eau distillée stérile et agitez le mélange pour solubiliser partiellement les composants hydrocarburés du pétrole.

Laissez le mélange se déposer, en le séparant en fractions d’huile solubles dans l’eau et insolubles dans l’eau.

Préparez des plaques d’agar sélectives en utilisant chaque fraction d’huile comme seule source de carbone pour enrichir les bactéries qui dégradent soit les hydrocarbures solubles, soit les hydrocarbures hydrophobes.

Placez les échantillons d’eau de mer dilués sur le milieu sélectif et incubez à température ambiante.

Les colonies qui émergent reposent sur des enzymes telles que l’hydroxylase et les dioxygénases pour métaboliser les hydrocarbures.

Choisissez des colonies morphologiquement distinctes et réinjectez-les sur un milieu frais contenant la même fraction pétroleuse afin d’obtenir des cultures pures de bactéries dégradant les hydrocarbures.

Cette méthode permet l’isol