Une approche basée sur la chromatographie liquide et la spectrométrie de masse pour analyser les métabolites de S. aureus

Commencez par Staphylococcus aureus suspendu dans une solution de trempe contenant des billes de silice, stockées à basse température pour préserver son état métabolique.

Homogénéisez les bactéries dans des conditions froides pour libérer le contenu intracellulaire tout en minimisant la dégradation enzymatique des métabolites.

Centrifugez le lysat et récoltez le surnageant riche en métabolites.

Ajoutez un solvant organique à l’extrait et au vortex pour précipiter les macromolécules à partir de métabolites solubles.

Centrifugeuse pour pelleter le précipité et transférer le surnageant dans des fioles.

Chargez les fioles dans un système de chromatographie liquide-spectrométrie de masse.

À l’intérieur de la colonne chromatographie, les métabolites interagissent avec la phase solide stationnaire en fonction de leurs propriétés chimiques.

Ajoutez un tampon pour éluer les métabolites. Ensuite, dirigez les métabolites vers la source d’ionisation par électropulvérisation du spectromètre de masse pour les ioniser.

Les ions sont ensuite séparés selon leur rapport masse/charge.

Les données résultantes sont comparées à une base de données de référence pour identifier les métabolites.

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