Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
0 vues • 3:04 min • January 30th, 2026
Commencez par une culture de Legionella pneumophila, une bactérie Gram négative pathogène qui libère des vésicules membranaires externes.
Ces OMV contiennent des lipopolysaccharides et des protéines membranaires qui contribuent à la virulence bactérienne.
Centrifugez la culture pour pelleter les bactéries intactes.
Collectez les OMV contenant le surnageant et centrifugez à nouveau pour pelleter les bactéries résiduelles.
Filtrez le surnageant à travers une membrane pour éliminer les bactéries restantes tout en conservant les OMV.
Effectuez une seconde filtration à l’aide d’une membrane fraîche pour éliminer les débris bactériens.
Collectez le filtrat sans bactéries et ultracentrifugez-le pour pelleter les OMV.
Jetez le surnageant, remettez le pellet en tampon, puis faites de l’ultracentrifugeuse pour éliminer les protéines faiblement associées et les lipopolysaccharides.
Retirez le surnageant et suspendez à nouveau les OMV purifiés en tampon.
Strier une aliquote des OMV sur les plaques d’agar sanguin et BCYE et incuber.
L’absence de formation de colonies confirme l’absence de contamination bactérienne.
Conservez les OMV à basse température pour les études d’interaction hôte-pathogène.
Ajoutez
Consultez la transcription complète et accédez à des milliers de vidéos scientifiques