JoVE Encyclopedia of Experiments
Microbiologie
0 vues • 2:02 min • January 30th, 2026
Commencez par une mouche Drosophila précédemment infectée par un agent bactérien colonisateur de l’intestin.
Transférez la mouche dans un tube stérile contenant un support alimentaire pour mouches.
Laissez la mouche tranquille pour qu’elle se nourrisse de la nourriture.
À l’intérieur de l’intestin des mouches, les bactéries pathogènes utilisent les nutriments de la nourriture et se multiplient.
Lorsque la mouche excrète, certaines bactéries sont également libérées.
Après une période fixe, transférez la mouche dans un tube frais avec de la nourriture et répétez le processus plusieurs fois.
Ensuite, jetez la mouche du dernier tube.
Ajoutez un tampon à chaque tube et un vortex pour libérer les bactéries des excréments de mouches.
Préparez des dilutions en série de la solution récupérée de chaque tube.
Placez les solutions diluées sur une plaque d’agar nutritive et incubez pour permettre la croissance des colonies bactériennes.
Compter les colonies pour déterminer le nombre de bactéries viables libérées par la mouche infectée au fil du temps, ce qui reflète son potentiel de transmission de l’infection.
Pour mesurer la déplongation bactérienne, transférer des mouches individuelles dans des tubes de 1,5 millilitre contenant environ 50 microlitres de milieu de Lewis.
Changez la sonde toutes les 24 heures. Après trois tubes remplis pendant 24 heures, éliminez les mouches. Après chaque transfert, mesurez les bactéries contenues dans le tube.
Mélangez le contenu du tube avec 100 microlitres de PBS à l’aide d’un vortex. Ensuite, mesurez les UFC dans le mélange en plaquant les dilutions sérieuses.