Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
0 vues • 2:02 min • February 2nd, 2026
Prenez une souris anesthésiée avec des incisions cutanées infectées par une bactérie pathogène.
La bactérie est génétiquement modifiée pour transporter un plasmide contenant le système rapporteur luxABCDE , qui permet une bioluminescence autonome.
Placez la souris en position couchée sur la plateforme d’imagerie de bioluminescence.
Au site d’infection, les gènes luxA et luxB de la bactérie codent pour l’enzyme luciférase, tandis que les gènes luxCDE codent pour des enzymes synthétisent des aldéhydes graisseuses à longue chaîne, qui servent de substrat à la luciférase.
En présence d’oxygène, la luciférase catalyse l’oxydation de son mononucléotide de flavine réduite, qui réagit ensuite avec l’aldéhyde gras à longue chaîne, produisant une lumière bleu-vert.
Cette bioluminescence indique la présence de bactéries métaboliquement actives au site de l’infection.
À l’aide du système d’imagerie, imagez le site d’infection et quantifiez l’intensité du signal de bioluminescence.
Pour l’imagerie in vivo des plaies infectées, suivez les protocoles de confinement de niveau deux de biosécurité pour le transport des souris vers et depuis l’instrument d’imagerie et placez la souris anesthésiée en positio
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