Imagerie en temps réel de l’infection bactérienne dans un modèle murin utilisant la bioluminescence

Prenez une souris anesthésiée pré-infectée par une souche bactérienne pathogène conçue pour exprimer un opéron bioluminescence génétiquement intégré.

L’opéron code la luciférase et un complexe multienzymatique qui synthétise son substrat.

L’enzyme luciférase catalyse une réaction avec ces substrats, produisant une luminescence visible.

Placez la souris en position couchée sur la plateforme stabilisée par la température d’une chambre d’imagerie et maintenez l’anesthésie pendant l’imagerie.

Utilisez le système d’imagerie pour capturer à la fois les images bioluminescentes et les images à rayons X correspondantes de la souris.

L’image bioluminescente révèle l’étendue de l’infection bactérienne, tandis que l’image aux rayons X fournit une référence anatomique pour la localisation de l’infection.

Après l’imagerie, remettez la souris dans sa cage et laissez la récupération.

Capturez des images de bioluminescence à intervalles réguliers pour surveiller la progression en temps réel de l’infection bactérienne.

Au fil du temps, la présence de signaux bioluminescents à divers endroits confirme la propagation de l’infection dans tout l’hôte.

Pour imager les animaux, préparez le système d’imagerie en réglant les paramètres de la caméra et en chauffant la scène. Réglez le débit d’oxygène à 1,5 litre par minute et l’isoflurane à 3,5 %, puis déplacez la souris vers la chambre anesthésique, puis vers le stade stabilisé par température, après l’anesthésie. Placez la souris sur le dos, les bras tendus, et placez un cône de nez pour l’administration de 2,5 % d’isoflurane lors de l’imagerie.

Fermez la porte et prenez des images bioluminescentes ainsi que des rayons X de la souris. Une fois l’imagerie terminée, remettez la souris dans sa cage et surveillez-la. Il devrait reprendre conscience dans 3 à 5 minutes.