Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
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Commencez par une plaque d’agar nutritive sélective complétée par du sang contenant des globules rouges.
Strie Staphylococcus aureus (S. aureus), une bactérie pathogène Gram-positive, sur l’agar et incube.
Pendant l’incubation, les bactéries utilisent les nutriments, grandissent et forment des colonies.
S. aureus sécrète de l’hémolysine, une toxine formatrice de pores qui lyse les globules rouges de l’agar et produit des zones claires et transparentes autour des colonies, signe d’hémolyse.
Sélectionnez une colonie hémolytique, inoculez-la dans un bouillon nutritif, puis incubez-la dans des conditions rotatives pour soutenir la croissance bactérienne.
À l’aide d’un spectrophotomètre, mesurez la densité optique (OD) pour déterminer la concentration bactérienne.
D’après la lecture de l’OD, transférez une aliquote dans un bouillon nutritif frais pour diluer les cellules, puis incubez dans un bain-marie avec secouement.
Mesurez la OD à intervalles réguliers.
Un OD proche de 0,8 indique que les bactéries ont atteint la phase de croissance exponentielle avec une physiologie uniforme.
Ce S. aureus hémolytique est prêt pour des études d’interaction hôte-pathogène.
Commencez par streaker S. Souches d’
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