Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
0 vues • 2:29 min • January 30th, 2026
Prenons un embryon de poisson-zèbre infecté par Mycobacterium abcessus, une bactérie pathogène qui cible le système nerveux central et forme des abcès contenant des bactéries et des cellules immunitaires de l’hôte.
Incubez l’embryon sur de la glace pour l’immobiliser, puis exposez-le à une surdose d’anesthésique pour stopper l’activité cardiaque et neuronale, ce qui entraîne la mort.
Lavez l’embryon pour retirer l’anesthésique résiduel.
Ajoutez une solution détergente pour perturber les membranes cellulaires et lyser l’embryon.
Cisaillez le lysat à l’aide d’une aiguille pour homogénéiser le tissu et libérer les bactéries.
Centrifugez, jetez le surnageant et remettez le pellet en suspension dans une solution de tensioactif pour éviter l’agglomération bactérienne.
Diluez en série la suspension bactérienne et étalez-la sur des plaques d’agar.
Le milieu est complété par des antibiotiques pour inhiber la croissance d’autres microbes tandis que les cellules de Mycobacterium conçues pour la résistance aux antibiotiques prolifèrent.
Incuber pour favoriser la formation de colonies, permettant de quantifier la charge bactérienne de l’embryon.
Pour énumérer les unités formant des colonies ou les UFC a
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