Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
0 vues • 2:19 min • February 2nd, 2026
Commencez par une culture d’une souche d’Aeromonas , un pathogène bactérien, cultivé dans un milieu riche en nutriments.
Mesurez la densité optique de la culture et ajustez la concentration bactérienne pour assurer une charge infective constante.
Placez la culture sur un milieu de croissance nématode ou une agar NGM et incubez pour former une couche bactérienne uniforme.
Préparer des larves de C. elegans synchronisées dans le développement — un nématode bactérivore maintenu sur un milieu enrichi.
Transférez les larves sur la couche bactérienne et incubez pour permettre l’ingestion orale d’Aeromonas et permettre la colonisation intestinale.
À l’intérieur de l’hôte, les bactéries se multiplient et libèrent des cytotoxines qui endommagent les cellules épithéliales intestinales et entraînent la mortalité.
Transférez les nématodes survivants sur des plaques bactériennes fraîches et comptez quotidiennement le nombre de vers vivants, morts et non réactifs jusqu’à ce que le dernier ver meure.
Enfin, générez une courbe de survie pour évaluer la viabilité de l’hôte au fil du temps.
Tout d’abord, sélectionnez une seule colonie de chacune des quatre souches d’Aeromonas et cultivez-les selon le protocole textuel. Ensuite, mesurez l’absorbance OD600 du bouillon bactérien et ajustez-la jusqu’à ce que l’absorbance soit égale à 2,0.
Ensuite, localiser et répartir 30 microlitres de bouillon bactérien de chaque souche dans des plaques NGM.
Sélectionnez et transférez au hasard les vers L4 préalablement préparés sur les plaques NGM avec les souches Aeromonas. Ensuite, incubez les plaques à 20 degrés Celsius jusqu’à la fin du test.
Chaque jour, transférez tous les vers vivants sur une nouvelle plaque NGM contenant des bactéries. Comptez chaque jour le nombre de vers vivants, morts et capteurs jusqu’à ce que le dernier ver soit mort.