Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
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Commencez par une suspension d’E. pathogène aviaire. coli ou APEC dans le milieu de croissance.
L’APEC est une bactérie à Gram négatif qui infecte la volaille en pénétrant par les voies respiratoires.
Après avoir percé la couche muqueuse, les APEC adhèrent aux cellules épithéliales, se multiplient localement et perturbent la barrière épithéliale pour pénétrer dans la circulation sanguine. La bactérie se propage ensuite à plusieurs organes, provoquant une infection systémique.
Ajouter un volume égal de suspension bactérienne à chaque puits d’une plaque multi-puits contenant des concentrations croissantes de l’antibiotique enrofloxacine.
Scellez la plaque et incubez dans des conditions optimales de croissance bactérienne.
Lors de l’incubation, l’enrofloxacine pénètre dans les cellules bactériennes et se lie à l’ADN gyrase, inhibant ainsi son interaction avec l’ADN.
Cette interférence arrête la réplication de l’ADN et entraîne la mort bactérienne des cellules.
Après l’incubation, examinez visuellement chaque puits pour détecter la turbidité, ce qui indique la croissance bactérienne.
La concentration la plus faible d’enrofloxacine qui ne présente aucune turbidité visible est identifiée comme la concentration inhibitrice minimale de l’antibiotique.