Interaction hôte médiée par FIMH des cloaques d’Enterobacter dans un modèle cellulaire épithélial de la vessie

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Prenez des cultures de cellules épithéliales de la vessie urinaire humaine dans une plaque multipuits.

Incubez la culture témoin avec des cloaces Enterobacter sauvages, une bactérie pathogène aux piles et des structures semblables à des poils à la surface bactérienne.

La sous-unité FimH du pili se lie au récepteur de la cellule hôte, ancrant les bactéries sauvages à la cellule hôte.

Incuber la culture expérimentale avec une cloaque mutante d’Enterobacter dépourvue de FimH.

Sans FimH, les bactéries mutantes ne parviennent pas à adhérer aux cellules hôtes.

Après l’incubation, lavez-vous avec un tampon pour éliminer les bactéries non liées.

Ajoutez un tampon de lyse et incubez sous agitation pour perturber les cellules hôtes et libérer les bactéries adhérées.

Diluez en série les lysats, placez-les sur un milieu nutritif, puis incubez-les.

Le lysat de la culture témoin produit des colonies, tandis que celui de la culture expérimentale n’en donne pas, confirmant que FimH est essentiel à l’adhésion bactérienne aux cellules hôtes.