Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
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Prenez une plaque multipuits contenant des suspensions d’une bactérie non pathogène, servant de témoin, ainsi que diverses souches de bactéries pathogènes pour évaluer leur virulence relative.
Les bactéries sont en suspension dans un milieu limité en nutriments afin d’éviter la surcroissance et d’imiter un environnement propice à l’infection.
Ajoutez des vers C. elegans de stade L4 à chaque puits et incubez la plaque sous agitation continue pour renforcer le contact entre les bactéries et les vers.
Les vers se nourrissent des bactéries, qui pénètrent dans leur tube intestinal et le colonisent.
Les bactéries pathogènes libèrent des toxines qui endommagent les tissus intestinaux, entraînant une toxicité systémique et la mort des vers.
Après l’incubation, comptez les vers vivants dans chaque puits et générez un graphique pour évaluer leurs taux de survie.
Les différences dans les taux de survie des vers reflètent la virulence relative de chaque souche bactérienne.
Après avoir cultivé les souches d’Aeromonas et mesuré leur absorbance comme décrit précédemment, centrifugez le bouillon bactérien à 3 500 g pendant 15 minutes. Ajustez le bouillon bactérien avec un S Medium et ajoutez 195 microlit
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