JoVE Encyclopedia of Experiments
Microbiologie
0 vues • 2:11 min • February 26th, 2026
Prenez deux plats contenant des matrices d’alginates imprimées en 3D, chacun encapsulant soit des souches bactériennes témoins, soit testées.
Les deux souches expriment constitutivement une protéine fluorescente pour la visualisation. La souche test contient également un gène inductible pour produire des fibres extracellulaires protéiques appelées fibres curli.
Les motifs sont imprimés sur un support solide complété en calcium et en rhamnose.
Incubez pour permettre aux ions calcium de réticuler l’alginate, formant un hydrogel.
Dans la souche testée, le rhamnose induit la production de sous-unités de curli, qui s’auto-assemblent à la surface cellulaire en fibres.
Utilisez un scanner fluorescent pour imager les motifs.
Traiter avec une solution chélante du calcium et incuber par secouage pour séquestrer les ions calcium, ce qui perturbe les liaisons d’alginate et dissout l’hydrogel.
Abandonnez la solution et réimaginez les motifs.
Le traitement a provoqué la dissolution du motif témoin, tandis que le modèle de test est resté intact grâce au réseau stabilisant de fibres curli.
Incubez les échantillons imprimés à température ambiante pendant trois à six jours pour permettre la production des composants du biofilm, tels que les fibres de Curli.
Ensuite, placez la plaque sur un scanner fluorescent et imagez les plaques.
Pour dissoudre la matrice d’alginate, ajoutez 20 millilitres d’une solution de citrate de sodium à 0,5 molaire au pH 7 sur le substrat imprimé, faites couver la plaque à température ambiante pendant deux heures tout en secouant à 30 tr/min.
Ensuite, jetez le liquide et reprenez l’image des plaques, afin de comparer avec les images des plaques avant et après le traitement au citrate.