Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
0 vues • 2:52 min • March 31st, 2026
Commencez par une lame scellée contenant des cellules bactériennes marquées avec un marqueur fluorescent rouge cytoplasmique et un marqueur fluorescent vert spécifique à chaque protéine.
Observez la lame sous un microscope à fluorescence.
Localiser un champ contenant des cellules bactériennes bien isolées et concentrez-vous sur le centre d’une cellule représentative.
Régler le premier canal de fluorescence et acquérir une image en pile z à des paramètres spécifiques pour capturer la forme tridimensionnelle de la cellule représentative et de ses cellules voisines.
Ensuite, basculez vers le second canal de fluorescence et obtenez une autre image z-stack des mêmes cellules avec les mêmes paramètres.
Il capture la distribution des protéines bactériennes à l’intérieur des cellules.
Recadrez des cellules individuelles de chaque pile z pour les isoler en vue d’une analyse monocellule.
Alignez ces images pour visualiser la distribution des protéines bactériennes par rapport à la forme cellulaire, permettant une analyse précise lors des interactions hôte-pathogène.
Immédiatement après avoir scellé la gaine de couvercle, placez la lame sur une scène de microscope et, après cinq minutes d’équilibre t
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