Évaluation microscopique de l’inhibition enzymatique de la formation de biofilms
Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
0 vues • 3:47 min • February 26th, 2026
Commencez par deux micro-plats à fond de verre contenant des suspensions d’une bactérie formatrice de biofilms.
La plaque de traitement contient une enzyme active perturbatrice de la signalisation, tandis que le témoin inclut l’enzyme inactivée.
Couvrez les plats et faites couver pour permettre l’adhérence bactérienne à la surface du micro-plat.
Lavez pour éliminer les cellules non adhérentes, puis introduisez un nouveau milieu contenant les enzymes et incubez.
Dans la boîte témoin, les bactéries communiquent par des molécules de signalisation et produisent des substances polymériques extracellulaires (EPS), formant un biofilm.
L’enzyme active dégrade les molécules de signalisation, perturbant leur fonction et réduisant la formation de biofilms.
Reconstituer avec un nouveau milieu et incuber davantage pour renforcer les effets perturbateurs de biofilms de l’enzyme.
Retirez le milieu, ajoutez des lectines marquées sous fluorescence et incubez pour permettre la liaison des lectines à l’EPS.
Lavez-le pour éliminer toute lectine non liée.
Incubez avec un fixateur pour préserver l’architecture du biofilm, puis rincez la plaque.
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