Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
0 vues • 3:41 min • February 26th, 2026
Prenez une suspension de bactéries pathogènes.
Ajoutez la suspension à une culture adhérée de macrophages dérivés de la moelle osseuse ou de cellules BMDM et incubez.
Les bactéries utilisent leurs protéines de surface pour se lier aux récepteurs des cellules hôtes, facilitant ainsi l’adhésion.
Rincez avec un tampon pour éliminer les bactéries non adhérées.
Ajoutez un nouveau substrat et incubez.
Les bactéries adhérées sont ensuite intériorisées par la cellule hôte.
Ajoutez un antibiotique pour éliminer les bactéries non internalisées.
Jetez le support et lavez avec un tampon.
Ajoutez de l’eau froide pour lyser la cellule hôte, libérant ainsi le contenu cellulaire, le noyau et les bactéries intériorisées.
Collectez le lysat cellulaire et centrifugez pour précipiter les débris cellulaires.
Collectez le surnageant contenant la bactérie. Faites-le passer dans un dispositif de filtration pour capturer les bactéries intactes.
Pliez le papier filtre et placez-le dans un tube.
Congélation rapide dans de l’azote liquide pour préserver l’intégrité cellulaire.
Conserver dans des conditions froides pour une utilisation ultérieure.
En utilisant 0,5 millilitre de la suspension bactérienne lavée, infectez chaq
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