Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
0 vues • 2:47 min • March 31st, 2026
Commencez par une souris anesthésiée avec le dos rasé.
Placez la souris avec un couvercle de boîte de Petri placé sous son abdomen pour garder le dos horizontal.
Immergez un bloc de laiton dans un bécher contenant de l’eau bouillante jusqu’à ce qu’il soit chauffé.
En attendant, administrez un analgésique par injection sous-cutanée.
Ensuite, appuyez le bloc en laiton chauffé sur le dos rasé de la souris.
La chaleur endommage la couche la plus externe de la peau, l’épiderme, et se propage aux tissus sous-jacents, créant une brûlure.
Retirez le bloc et injectez du sérum physiologique par voie sous-cutanée pour éviter la déshydratation.
Ensuite, appliquez un inoculum de bactéries pathogènes en suspension dans un tampon.
Utilisez un coton-tige-coton stérile pour répartir uniformément les bactéries sur la plaie.
Les bactéries s’attachent aux récepteurs cellulaires à l’aide de protéines de surface, commencent la colonisation, forment un biofilm protecteur et établissent une infection localisée.
Ce modèle murin d’infection par brûlures est prêt pour des études d’interaction hôte-pathogène.
Après avoir anesthésé une souris, selon le protocole textuel, utilisez une tondeuse à cheveux à 50 lames pour raser la souris dans le dos afin d’exposer autant de peau que possible. Ensuite, placez le couvercle d’une boîte de Pétri de 35 millimètres sous l’abdomen de la souris pour maintenir le dos dans une position relativement horizontale.
Utilisez une plaque chauffante de 10 pouces par 10 pouces et 220 VAC pour faire bouillir de l’eau dans un bécher de 150 millilitres. Immergez un bloc en laiton dans le bécher jusqu’à ce que l’équilibre thermique avec l’eau soit atteint. Avant de provoquer la brûlure, administrez une injection sous-cutanée d’analgésiques préventifs pour soulager la douleur.
Dix minutes plus tard, en portant des gants thermiques, appuyez doucement le bloc de laiton chauffé sur la zone rasée du dos de la souris pendant sept secondes pour provoquer des brûlures. Administrez 0,5 millilitre de solution saline stérile par injections sous-cutanées. Cinq minutes après l’induction de la lésion thermique, utilisez une pipette pour inoculer 50 microlitres de suspension bactérienne contenant 5 fois 10 à la sixième UFC en PBS sur les brûlures de souris.
Ensuite, en déplaçant un coton tige-coton stérile en zigzag sur la peau, étalez l’aliquote sur les brûlures pour répartir les cellules bactériennes dans la zone brûlée aussi uniformément que possible.