Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
0 vues • 2:52 min • March 31st, 2026
Commencez par une souris anesthésiée, le dos exposé, posée sur un couvercle de boîte de Petri.
La souris a une brûlure infectée par des bactéries bioluminescentes résistantes aux médicaments.
Couvrez les yeux de la souris avec du papier aluminium pour éviter une surexposition à la lumière bleue.
Placez la souris sous un appareil LED bleu à une distance fixe.
Irradiez la blessure à une intensité constante. Augmentez le temps d’exposition pour délivrer des doses plus élevées.
La lumière pénètre le tissu de la plaie et atteint les bactéries colonisatrices.
Au sein de ces bactéries, les molécules sensibles à la lumière absorbent la lumière bleue et deviennent photoactivées, produisant des espèces réactives de l’oxygène (ROS).
Les ROS endommagent les composants bactériens, y compris les protéines bioluminescentes, entraînant la mort cellulaire bactérienne avec un minimum de dommages aux tissus environnants.
Après chaque exposition, réalisez l’imagerie par bioluminescence pour surveiller la viabilité bactérienne autour de la plaie.
À mesure que la dose augmente, le signal diminue en conséquence.
Ce déclin indique l’effet antibactérien du stress oxydatif induit par la lumière bleue.
Après anesthésie des souris, selon le protocole textuel, divisez aléatoirement les animaux en un groupe antimicrobien à lumière bleue ou traité à l’aBL et un groupe témoin non traité. Pour le groupe traité par aBL, utilisez du papier aluminium pour couvrir les yeux des souris afin d’éviter une surexposition à la lumière. Placez les brûlures de souris directement sous la LED avec un couvercle d’une boîte de Petri de 35 millimètres sous l’abdomen de la souris pour garder le dos en position horizontale.
Ensuite, remplacez la jauge d’énergie par une souris sur une boîte de Pétri carrée. Ensuite, ajustez la hauteur de la souris à une position où la distance entre l’ouverture de la LED et la surface de la brûlure de la souris est égale à la distance entre l’ouverture de la LED et le capteur lumineux du compteur d’énergie de puissance. Irradiez les brûlures infectées à une irradiance de 100 milliwatts par centimètre carré.
Administrez l’aBL en aliquotes de 72 joules pour centimètre carré jusqu’à ce que la dose totale de 360 joules pour centimètre carré soit atteinte. Après chaque dose de lumière, réalisez une imagerie bioluminescente des brûlures de souris, comme démontré plus tôt dans cette vidéo. Pour le groupe témoin non traité, réalisez l’imagerie bioluminescente des brûlures de souris en utilisant les mêmes intervalles de temps que pour le groupe traité à l’aBL.