Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
0 vues • 3:02 min • February 26th, 2026
Commencez par une lame contenant une section de tissu cardiaque fixée chimiquement provenant d’une souris infectée par Streptococcus pneumoniae, une bactérie pathogène.
Cette infection provoque la formation de microlésions extracellulaires remplies de bactéries dans les muscles cardiaques.
Lavez la section avec un tampon pour éliminer tout fixateur résiduel.
Appliquez un détergent non ionique pour perméabiliser les membranes cellulaires de l’hôte.
Lavez à nouveau pour éliminer tout reste de détergent.
Incubez la coupe avec un agent bloqueant pour bloquer les sites de liaison non spécifiques.
Rincez pour éliminer l’agent bloqueant non lié.
Introduisez un anticorps primaire qui se lie au polysaccharide capsulaire de la bactérie.
Lavez-vous pour éliminer tout anticorps non lié, puis ajoutez un anticorps secondaire vert marqué par fluorophore qui se lie à l’anticorps primaire.
Contre-coloration avec un colorant nucléaire pour marquer les noyaux de la cellule hôte.
Lavez la section et montez-la avec un support de montage.
Observez la section à l’aide d’une microscopie confocale pour visualiser les bactéries marquées dans les microlésions.
En utilisant une section cardiaque de 5 microns sur des lame
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