Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
0 vues • 2:33 min • February 26th, 2026
Commencez par des plaques contenant des bactéries attachées à la surface ainsi que des bactéries planctoniques ou flottantes libres.
Ajoutez des cellules d’amibe aux deux échantillons.
Placez un tampon d’agarose contenant du Calcein-AM, un colorant perméable aux cellules, sur chaque échantillon.
Retirez l’excès de liquide, laissez sécher et faites couver les assiettes.
Dans la plaque avec des bactéries attachées à la surface, le contact de surface régule à l’augmentation les gènes de virulence, exprimant ainsi des toxines.
Ces toxines perturbent la membrane de l’amibe et modifient leur forme.
Une membrane d’amibe endommagée permet à plus de calcéine-AM d’entrer dans le cytoplasme, où les estérases intracellulaires les clivent en calcéine fluorescente, entraînant son accumulation.
En revanche, les bactéries planctoniques, dépourvues de contact de surface, restent non virulentes, laissant intactes les membranes de l’amibe. Cela réduit l’entrée de Calcein-AM dans l’amibe, limitant l’accumulation de calcéine fluorescente.
Les amibes saines engloutissent également les bactéries non virulentes.
Au microscope fluorescent, les cellules d’amibes brillantes et arrondies indiquent une interaction bact
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