Visualisation des métabolites des acides aminés dans les tissus intestinaux de souris infectées

Prenez des cryosections tissulaires du cæcum, une région du gros intestin. Une section provient d’une souris infectée uniquement par Clostridioides difficile. L’autre section provient d’une souris co-infectée par C. difficile et Enterococcus faecalis.

Dans le tissu co-infecté, E. faecalis métabolise l’arginine de l’hôte et libère de l’ornithine. C. difficile absorbe cette ornithine, favorisant la production de toxines associées à la croissance et les dommages tissulaires.

Pour analyser ces échantillons à l’aide de l’imagerie MALDI, appliquez une couche uniforme de solution matricielle.

Chargez les lames dans un spectromètre de masse MALDI, où un laser scanne les tissus, ionisant les acides aminés à travers la matrice.

Chargez les lames dans un spectromètre de masse MALDI, où un laser scanne les tissus, ionisant les acides aminés à travers la matrice.

Les ions résultants sont séparés par leur rapport masse/charge et détectés par l’instrument pour créer des cartes spatiales de la distribution des acides aminés.

Le tissu co-infecté présente des niveaux d’arginine plus faibles et plus d’ornithine que l’échantillon monoinfecté, ce qui soutient la pathogenèse de C. difficile liée à la coopération microbienne.

Effectuer l’application de la matrice MALDI et la spectrométrie de masse d’imagerie MALDI comme démontré précédemment.

Analysez les images ionique de plusieurs réplications biologiques, puis comparez les résultats pour obtenir une signification via des comparaisons de diagrammes en boîte d’intensité à l’aide du logiciel statistique SCiLS.