Préparation des colonies de biofilms bactériens pour l’analyse morphologique

0 vues • 3:54 min • February 26th, 2026

Commencez par des colonies de biofilm bactérien cultivées sur une plaque d’agar nutritif.

Ces biofilms consistent en une matrice extracellulaire hydrophobe qui protège les bactéries encapsulées contre les réponses immunitaires de l’hôte.

Ajoutez un fixateur et faites pivoter doucement la plaque jusqu’à ce que le biofilm commence à flotter.

Scellez la plaque et incubez en le secouant doucement pour préserver la structure du biofilm.

Retirez le fixateur, ajoutez un tampon et incubez pour stabiliser la structure du biofilm.

À l’aide d’une pipette Pasteur, détachez doucement la colonie de l’agar.

Ajoutez des concentrations croissantes d’éthanol pour déshydrater les colonies bactériennes.

Transférez une colonie flottante sur un papier filtre imbibé d’éthanol et laissez-la sécher à l’air libre dans une chambre fermée.

Montez les colonies séchées sur un tronc et un pont recouverts de ruban de carbone avec du ruban de carbone pour éviter la charge induite par le faisceau d’électrons.

Ensuite, enduisez le biofilm d’une couche métallique conductrice pour améliorer le contraste d’imagerie.

Le biofilm est désormais prêt pour une analyse morphologique par microscopie électronique.

Pour commencer la fixati

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