Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
0 vues • 2:59 min • March 31st, 2026
Commençons par des puits de microplaques contenant des biofilms d’une bactérie pathogène, divisés en quatre groupes expérimentaux.
Aspirez doucement le milieu et rincez avec un tampon pour éliminer les cellules non adhérentes.
Ajouter un tampon contenant un précurseur photosensible à deux groupes, tandis que les deux autres reçoivent uniquement le tampon.
Incubez tous les groupes dans l’obscurité pour permettre au précurseur de diffuser à travers le biofilm, d’entrer dans les cellules bactériennes et d’être métabolisé en un photosensibleur qui s’accumule dans le cytoplasme et les membranes.
Après l’incubation, exposez un groupe traité par un précurseur et un groupe tampon uniquement à une irradiation lumineuse.
Dans le groupe traité par les précurseurs, la lumière excite le photosensibilisateur, qui transfère de l’énergie à l’oxygène moléculaire et génère des espèces réactives d’oxygène (ROS).
Les ROS perturbent les membranes, dégradent les protéines et fragmentent l’ADN, entraînant la mort bactérienne des cellules.
Les trois autres conditions ne produisent pas de ROS, car le précurseur ou la lumière sont absents, laissant le biofilm intact.
Pour générer un biofilm dans une plaque à 96 pui
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