Préparation d’échantillons et imagerie de bactéries marquées par fluorescence

Commencez par une grande lame en verre avec de petites lames placées sur chaque bord, en double couche.

Verser de l’agarose en fusion dans l’espace et recouvrez-la d’une autre grande lame en verre.

Refroidissez le montage pour solidifier l’agarose.

Retirez les lames en verre et découpez l’agarose en petits coussins.

Placez les tampons d’agarose dans un cadre adhésif fixé à une glissière.

Prenez une culture de bactéries pathogènes, génétiquement modifiées pour exprimer un système de sécrétion marqué par fluorescence, essentiel à l’infection de l’hôte.

Utilisez une plaque bactérienne dense et suspendez-la dans l’eau.

Vortex pour disperser les bactéries uniformément.

Appliquez la suspension sur le coussinet d’agarose pour immobiliser les bactéries.

Scellez avec une housse pour maintenir l’hydratation.

Sous éclairage en champ clair, sélectionnez un champ de cellules pour l’imagerie.

Optimisez les réglages du microscope pour réduire le photoblanchiment et augmenter la sensibilité du signal.

Passez au canal de fluorescence pour détecter les bactéries marquées par fluorescence.

Commencez par fabriquer des tampons d’agarose pour l’imagerie des cellules vivantes. Préparez environ 30 millilitres de solut