Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
0 vues • 2:48 min • March 31st, 2026
Commencez par le M marqué par fluorophore rouge. antigènes tuberculeux immobilisés sur une couche de couverture recouverte de polymère.
Ajoutez un tampon de blocage pour bloquer les sites de liaison non spécifiques. Lavez-le pour éliminer l’excès de bloqueur.
Introduire une protéine totale extraite des macrophages humains, incluant le récepteur de surface cellulaire d’intérêt. Incubez.
Les récepteurs des macrophages se lient aux antigènes bactériens immobilisés.
Ajouter un réticulateur pour stabiliser les complexes récepteur–antigène, suivi d’un quencher pour neutraliser les réticulateurs non réagis.
Lavez et ajoutez un second réticulateur pour renforcer les complexes.
Lave-toi encore. Ensuite, retirez la couche de couverture et inversez-la sur une solution primaire d’anticorps.
Les anticorps se lient au récepteur macrophage d’intérêt.
Lavez et inversez le vernis sur une solution secondaire d’anticorps conjuguée au fluorophore vert, qui se lie aux anticorps primaires.
Laver et fixer la toile de protection.
Visualisez l’échantillon sous un microscope à fluorescence. Les signaux rouges et verts co-localisés confirment l’interaction entre le récepteur des macrophages et l’antigène bactérien.
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