Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
0 vues • 3:03 min • March 31st, 2026
Prenez une culture bactérienne capable d’infecter le tissu foliaire.
Grattez les colonies et suspendez-les dans une solution salée.
Mesurez la densité optique pour évaluer la concentration bactérienne, puis diluez jusqu’à la OD souhaitée.
Effectuer des dilutions en série pour atteindre la concentration finale de l’inocule.
Ajoutez un tensioactif pour réduire la tension superficielle et assurer une propagation uniforme des bactéries sur la feuille.
Transférez la suspension dans une boîte de Petri.
Ensuite, placez deux bâtons en bois sur le dessus d’un pot d’Arabidopsis .
Inversez la plante sur le plat, en plongeant les feuilles dans la suspension.
Placez l’installation dans une chambre à vide et appliquez une impulsion sous vide
Le vide appliqué retire l’air du tissu foliaire par des ouvertures naturelles.
Relâcher le vide restaure la pression atmosphérique, forçant les bactéries à pénétrer dans les feuilles.
Répétez les impulsions pour obtenir une infiltration maximale.
Enlève le pot. Ensuite, épongez l’excès d’inocule.
Les feuilles d’Arabidopsis infectées par des bactéries sont prêtes à être analysées en aval.
Écartez le stock de glycérol de la souche d’intérêt de Pseudomonas syringae de moins
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