Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
0 vues • 2:00 min • March 31st, 2026
Commençons par des cellules cyanobactériennes fixes, immobilisées et perméabilisées adhérées à une couche de revêtement.
Ces cellules cyanobactériennes expriment des protéines régulatrices de croissance à faible abondance.
Lors de l’imagerie à fluorescence haute résolution, les pigments sensibles à la lumière naturelle dans les cellules cyanobactériennes émettent une fluorescence de fond.
Cela réduit la qualité de l’image lors de la visualisation de ces protéines à faible abondance.
Pour minimiser cette fluorescence de fond, placez la couche contenant les cellules cyanobactériennes dans un plat colorant.
Ajoutez un tampon bloquant contenant des protéines sériques pour empêcher la liaison anticorps non spécifique lors du traitement en aval et un détergent pour maintenir la perméabilité cellulaire.
Placez la plaque de teinture sur de la glace et exposez les cellules à une lumière xénon intense.
La lumière à haute intensité initie le photoblanchiment, décomposant les pigments photosensibles, tandis que les protéines régulatrices de croissance à faible abondance restent intactes.
Les conditions froides minimisent les dommages causés par la chaleur et préservent l’intégrité cellulaire.
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