Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
0 vues • 2:36 min • March 31st, 2026
Prenez une suspension d’une bactérie pathogène isolée sur une plante infectée.
Le génome bactérien contient une fusion transcriptionnelle, dans laquelle le promoteur d’un gène régulateur de la virulence favorise également l’expression d’un gène protéique fluorescent en aval, sans promoteur.
Lors de l’infection végétale, l’activation du promoteur déclenche la production des protéines régulatrices et fluorescentes.
La protéine régulatrice active les gènes de virulence, tandis que la fluorescence fournit une lecture mesurable de l’activation de la virulence.
Centrifugez les cellules, jetez le surnageant, puis resuspendez pour obtenir une suspension concentrée.
Placez une goutte sur une housse de couverture et posez un coussinet d’agarose pour disperser et immobiliser les cellules.
Capturez une image en champ clair pour identifier toutes les cellules bactériennes, puis une image de fluorescence pour détecter la fluorescence unicellulaire.
Fusionnez les deux pour visualiser les différences d’intensité de fluorescence, qui révèlent des sous-populations avec une expression génique de virulence élevée, faible ou nule.
Cette variation phénotypique reflète une stratégie adaptative qui améliore la su
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