Récupération du virus Zika à partir d'ARN transcrit in vitro
Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
0 vues • 3:36 min • August 31st, 2026
Commencez avec des tubes contenant une suspension de cellules Vero.
Ajouter de l'eau à l'échantillon témoin et introduire un ARN transcrit in vitro (IVT) dans l'échantillon expérimental.
L'ARN représente le génome complet du virus Zika.
Transférez chaque échantillon dans des cuvettes d'électroporation.
Appliquer l'électroporation.
Une brève impulsion électrique perturbe la membrane de la cellule hôte et crée des pores transitoires, permettant à l'ARN d'entrer dans les cellules.
Ajouter un milieu pour favoriser la récupération des cellules.
Transférez les cellules dans des flacons contenant un milieu.
Incuber pour permettre au ARN viral de diriger la synthèse des protéines et la réplication du génome, conduisant à l'assemblage de nouveaux virions.
Les virions sont libérés et se propagent vers les cellules voisines.
La charge virale intracellulaire croissante finit par provoquer la mort de la cellule hôte.
Surveiller les cultures au microscope.
Une mort cellulaire accrue dans l'échantillon expérimental par rapport au témoin confirme la récupération de virus infectieux à partir de l'ARN transcrit in vitro (IVT).
Un ou deux jours avant l'électroporation, préparez un flacon T182 de cellules Vero par
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