Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
0 vues • 4:35 min • August 31st, 2026
Commencez avec des cellules de mammifères infectées par un adénovirus.
Effectuez plusieurs cycles de congélation-dégeliation pour lyser les cellules et libérer les virions.
Centrifuger le lysat pour faire précipiter les débris. Recueillir le surnageant contenant les particules virales.
Disposez le surnageant viral sur un gradient pas à pas de chlorure de césium pour une séparation basée sur la densité.
Effectuer une ultracentrifugation afin de permettre aux particules virales de migrer selon leurs densités d'équilibre.
Les virions intacts contenant le génome adénoviral complet sont plus denses en raison de l'ADN empaqueté et migrent vers une bande inférieure, tandis que les capsides vides et les débris, plus légers, restent dans les couches supérieures.
Retirez les couches supérieures. Récupérez la bande inférieure des virions contenant le génome.
Resuspendre les virions dans un chlorure de césium de densité uniforme et procéder à une nouvelle ultracentrifugation afin d'affiner la séparation et de concentrer les particules complètes.
Jetez les couches supérieures et récupérez la bande inférieure.
Dialyser l'échantillon pour éliminer le chlorure de césium.
Les vecteurs adénoviraux contenant l
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