Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
0 vues • 2:08 min • August 31st, 2026
Commencez avec une souris anesthésiée placée en position dorsale, dont la peau thoracique a été rasée.
Assainir la peau rasée.
Utiliser l'imagerie par ultrasons pour visualiser le cœur et identifier la paroi externe du ventricule gauche.
Prenez une microseringue contenant un virus recombinant codant un gène test dont on soupçonne qu'il affecte la fonction cardiaque.
Sous guidage échographique, insérer l'aiguille dans la paroi ventriculaire.
Injecter le virus dans la couche musculaire de la paroi.
Effectuez une deuxième et une troisième injection en ciblant différents sites ventriculaires afin d'obtenir une expression génique plus étendue.
Retirer l'aiguille et laisser la souris se remettre.
Le virus se lie aux récepteurs présents sur les cellules musculaires ventriculaires, initiant ainsi une endocytose médiée par récepteur et le transport du génome viral vers le noyau.
L'expression du génome viral conduit à la synthèse de la protéine codée.
Le modèle murin est désormais prêt pour évaluer les effets de l'expression génique induite par le virus sur la fonction cardiaque.
Pour commencer, stériliser la région thoracique inférieure gauche de la souris anesthésiée par des applications alternées d'un antiseptique à base d'iode ou de chlorhexidine dans de l'alcool, en effectuant trois passages circulaires. Sous guidage échographique, introduire l'aiguille de la seringue contenant le virus dans la poitrine de l'animal.
Approchez la pointe de l'aiguille jusqu'à la paroi libre antérieure du ventricule gauche et injectez lentement 10 à 15 µL du virus. Vérifiez la réussite de l'injection sur les images échographiques par l'augmentation de la brillance au voisinage de la pointe de l'aiguille. Retirez l'aiguille du cœur et réinsérez-la dans d'autres régions du ventricule gauche pour une deuxième et une troisième injection de la même quantité de virus.