Préparation d'une suspension enrichie en virus par centrifugation sur gradient de saccharose discontinu

0 vues • 3:39 min • September 30th, 2026

Commencez avec un tube d'ultracentrifugation contenant un gradient de saccharose.

Ajouter soigneusement le surnageant contenant le virus sur le dessus.

Centrifuger avec une accélération et une décélération contrôlées afin de préserver le gradient, permettant aux particules de sédimenter dans la couche correspondant à leur densité d'hydrodynamique pendant la rotation.

Les protéines plus légères restent dans la couche supérieure. Les particules virales intactes se concentrent entre les couches de densité plus faible et plus élevée, tandis que les débris cellulaires plus lourds se déposent au fond.

Jetez les couches supérieures et recueillez les fractions intermédiaires de saccharose enrichies en virus dans un tube propre.

Ajouter le tampon et mélanger l'échantillon plusieurs fois.

Ensuite, déposez délicatement la suspension virale sur un coussin de saccharose de faible densité dans un tube neuf.

Centrifuger la suspension. Les particules virales plus lourdes sédimentent au fond, tandis que les contaminants plus légers restent dans le surnageant.

Jetez le surnageant. Égouttez le liquide restant en retournant le tube sur une serviette en papier.

Resuspendre le culot viral dans un tampon.

La suspe

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