Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
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Prendre des corps d'insectes infectés par le virus suspendus dans un tampon contenant un agent chélatant.
Homogénéisez pour briser les tissus des insectes et libérer les composants intracellulaires, notamment les particules virales et les ions métalliques réactifs.
L'agent chélatant se lie aux ions métalliques, empêchant la formation d'espèces réactives de l'oxygène et protégeant les particules virales contre les dommages oxydatifs.
Effectuer une ultracentrifugation pour former un culot contenant le virus et les débris insolubles, puis éliminer le surnageant.
Ajoutez un tampon contenant des sels et un détergent, puis resuspendez le culot par des pipetages répétés. Le détergent dissout les débris riches en lipides afin de libérer les particules virales associées.
Centrifuger pour former un culot des débris insolubles. Recueillir le surnageant contenant les particules virales.
Filtrer le surnageant pour éliminer les débris résiduels et recueillir le filtrat contenant le virus.
Dialyser le filtrat dans de l'eau à basse température afin d'éliminer l'excès de détergent et de sels tampons.
Remplacer l'eau périodiquement jusqu'à ce que les particules virales précipitent. Le virus est prêt à être
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