Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
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Commencez avec des cellules épithéliales humaines.
Le premier puits contient des cellules non transfectées, et le deuxième puits contient des cellules transfectées avec un mimétique de microARN.
Dans les cellules transfectées, un brin mimétique de microARN se lie à un complexe protéique pour former un complexe d'interférence ARN.
Retirer le milieu et ajouter la suspension virale.
Incuber pour permettre l'attachement viral.
Jetez le milieu et ajoutez du milieu frais, puis incubez.
Dans les cellules non transfectées, le virus subit une endocytose médiée par les récepteurs et pénètre dans la cellule.
Il libère le génome viral qui se réplique et produit de nombreuses particules virales.
Dans les cellules transfectées, le complexe d'interférence ARN reconnaît le génome viral, déclenchant sa dégradation et réduisant la production du virus.
De nouveaux virus sont libérés. Transférez le milieu contenant les virus.
Centrifuger pour former un culot des débris et récupérer les surnageants contenant le virus.
Ajouter le surnageant à des cellules non transfectées. Incuber pour l'infection virale.
Les puits traités avec le surnageant de cellules non transfectées montrent une mort cellulaire plus élevée, com
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