Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
0 vues • 2:44 min • September 30th, 2026
Commencez avec une plaque multi-puits contenant une dilution sériée du composé test afin d'évaluer l'activité antivirale.
Ajouter une suspension de cellules de rein embryonnaire humain contenant le virus de la rougeole recombinant exprimant la luciférase dans chaque puits.
Incuber pour permettre aux cellules d'adhérer au fond de chaque puits.
Dans le puits témoin sans le composé testé, le virus fusionne avec la membrane cellulaire et libère son génome dans le cytoplasme.
Le génome viral dirige la production d'ARN et de protéines virales, ainsi que de la protéine rapporteur luciférase.
Dans les puits de test, le composé antiviral inhibe la réplication virale, réduisant ainsi la production de luciférase.
Ajouter un substrat spécifique de la luciférase dans chaque puits, qui interagit avec la luciférase et émet une luminescence.
Utilisez un lecteur de plaque pour mesurer l'intensité de la luminescence dans chaque puits.
Une luminiscence plus faible dans les puits de test par rapport au puit témoin indique une inhibition virale.
Une diminution progressive de la luminiscence avec l'augmentation de la concentration du composé indique une inhibition dose-dépendante de la réplication virale.
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