Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
0 vues • 3:01 min • September 30th, 2026
Commencez par un puits témoin contenant des cellules tumorales génétiquement modifiées exprimant un antigène cible, et un puits de contrôle avec des cellules tumorales ne possédant pas l'antigène.
Prenez un engageur bispécifique de cellules T (BTE) codé par un transgène viral, possédant deux sites de liaison, l'un pour l'antigène cible et l'autre pour un récepteur spécifique des cellules T.
Ajouter le BTE et les cellules T dans les puits et incuber.
Dans l'échantillon test, le BTE relie le tumor et la cellule T, activant la cellule T pour libérer des granules cytolytiques.
Cela provoque la lyse de la cellule tumorale, libérant une enzyme intracellulaire.
Dans le témoin, le BTE se lie uniquement à la cellule T, évitant ainsi la lyse des cellules tumorales.
Centrifuger et recueillir le surnageant.
Ajouter un substrat et incuber.
L'enzyme catalyse la transformation du substrat en un produit de couleur rouge.
Ajouter une solution d'arrêt et mesurer l'intensité de la couleur.
Une intensité plus élevée dans l'échantillon test confirme l'activité immunomodulatrice spécifique de la cible du BTE.
Pour commencer l'évaluation de la cytotoxicité induite par les BTE et médiée par les cellules au moyen du
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