Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
0 vues • 3:44 min • September 30th, 2026
Commencez avec un mélange de plasmides contenant des plasmides auxiliaires codant pour les protéines de réplication et de transcription du VRS, ainsi qu'un plasmide distinct portant un ADN complémentaire d'antigénome complet du VRS exprimant la protéine verte fluorescente (GFP).
Chaque plasmide est placé sous le contrôle d'un promoteur T7.
Ajouter un réactif de transfection à base de liposomes et incuber pour permettre la formation de complexes.
Introduire ces complexes dans des cellules rénales de hamster génétiquement modifiées exprimant la polymérase ARN T7 et incuber.
Les complexes plasmidiques pénètrent dans les cellules, où la polymérase ARN T7 transcrit les plasmides RSV.
Ceci produit des ARNm viraux codant pour les protéines de réplication et de transcription et génère un ARN antigénomique RSV de sens positif.
À l'aide du mécanisme de l'hôte, ces ARNm produisent des protéines de réplication et de transcription virales qui forment un complexe polymérase RSV fonctionnel.
Le complexe polymérase du VRS convertit ensuite l'ARN de sens positif en ARN génomique viral.
Cet ARN génomique dirige la synthèse des ARNm viraux, qui codent pour les protéines structurales et la GFP.
Sous un microsc
Consultez la transcription complète et accédez à des milliers de vidéos scientifiques