Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
0 vues • 4:36 min • September 30th, 2026
Commencez avec des lentivirus portant un gène de résistance à un antibiotique.
Centrifuger pour séparer les débris. Recueillir le surnageant contenant les virus et le faire passer à travers une membrane sans surfactant.
Cela permet aux lentivirus de passer tout en retenant les contaminants.
Effectuer une ultracentrifugation pour concentrer les virus. Éliminer le surnageant et ajouter un tampon pour remettre les virus en suspension.
Ensuite, transférez la suspension dans un tube microcentrifuge et vortexez-la.
Centrifuger pour éliminer les bulles. Ensuite, ajouter les virus à un milieu d'infection contenant des cellules souches embryonnaires de souris et mélanger.
Centrifuger pour améliorer le contact virus-cellule, puis incuber.
Les virus délivrent leurs génomes dans les cellules.
Retirer le milieu, ajouter du milieu frais et incuber.
Le génome viral est converti en ADN et s'intègre dans le génome de l'hôte, permettant ainsi la production d'ARNm qui dirige la synthèse de la protéine de résistance à l'antibiotique.
Remplacer le milieu par du milieu frais supplémenté avec l'antibiotique de sélection et incuber.
Les cellules exprimant la protéine de résistance à l'antibiotique survivent, ce qui
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