Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiologie
0 vues • 4:33 min • September 30th, 2026
Prenez une plaque multipuits contenant des monocouches de cellules épithéliales et ajoutez une suspension virale dans les puits.
Incuber avec un léger balancement périodique pour répartir uniformément les virus. Les virus s'attachent aux cellules et pénètrent à l'intérieur.
Dans un puits, ajoutez de l'agarose fondue, qui se solidifie en une couche semi-solide.
Dans un autre puits, ajoutez une couche recouvrante liquide visqueuse à base de cellulose microcristalline et incubez. Sa viscosité limite la diffusion virale, de manière similaire à la couche recouvrante semi-solide.
À l'intérieur de la cellule, le virus libère son génome et produit de nouveaux ARN viraux et des protéines.
De nouveaux virus s'assemblent, quittent les cellules et provoquent la lyse cellulaire.
Les virus libérés infectent les cellules voisines, formant des plaques.
Aspirez la couche liquide et ajoutez un fixateur pour préserver les cellules non lysées.
Jetez le fixateur et retirez la couche d'agarose.
Ajoutez un colorant qui colore les cellules viables, laissant les plaques incolores. Ensuite, rincez l'excès de colorant.
La couche de recouvrement liquide produit un nombre de plaques comparable à celui de la couche de re
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