Implantation d’un poteau de tête de souris : une méthode de fixation de la tête chez les rongeurs
JoVE Encyclopedia of Experiments
Biologie
0 vues • 2:34 min • April 30th, 2023
Sur une souris anesthésiée dont la tête est rasée et préparée pour la chirurgie, faites une incision dans le sens de la longueur pour exposer le crâne. Ensuite, retirez délicatement la membrane du périoste pour exposer la surface du crâne. Cela aidera le ciment à mieux adhérer à l’os.
Appliquez un activateur pour augmenter la perméabilité osseuse. Ensuite, dans la zone située entre les repères lambda et bregma du crâne, appliquez du ciment fraîchement mélangé. Faites glisser le poteau de tête de lambda à bregma et appliquez plus de ciment pour vous assurer qu’il est solidement fixé.
Une fois que le ciment est complètement sec, appliquez de la résine fraîchement mélangée sur le ciment et autour du poteau de tête. Une fois la résine sèche, fermez la coupure en suturant la peau.
Après avoir confirmé une absence de réponse au pincement des orteils chez une souris sous sédation, utilisez une paire de pinces émoussées pour saisir la peau à l’arrière de la tête et utilisez des ciseaux pour faire une incision longitudinale de 1,5 centimètre pour exposer le crâne. Grattez doucement le périoste à l’aide d’un scalpel et appliquez une goutte d’activateur vert sur le milieu du crâne pour augmenter la perméabilité osseuse.
Ensuite, mélangez une cuillerée de polymère du kit d’implantation avec cinq gouttes de monomère et une goutte de catalyseur, et brossez une quantité généreuse de mélange de ciment entre les points de repère du crâne lambda et bregma. À l’aide d’un mouvement de balayage de lambda à bregma, placez rapidement le poteau de tête sur le ciment et réappliquez du ciment supplémentaire autour de la partie inférieure du poteau pour vous assurer que le poteau de tête adhère solidement au crâne.
Pendant que le ciment sèche, mélangez la poudre de résine avec la résine liquide jusqu’à obtenir une consistance lisse et appliquez le mélange de résine obtenu sur le ciment séché et autour du poteau de tête. Après avoir laissé sécher la résine pendant 3 minutes, utilisez une suture vicryl 4-0 pour fermer la peau à l’arrière des oreilles et utilisez un coton-tige pour appliquer une solution iodée à 10 % à 20 % sur l’incision. Ensuite, placez l’animal sous une lumière rouge avec surveillance jusqu’à ce qu’il se rétablisse complètement.
Aperçu
Cet article décrit une procédure chirurgicale pour l'implantation d'un embout crânien chez une souris anesthésiée. La méthode consiste à exposer le crâne, à appliquer du ciment et à fixer l'embout crânien en vue d'expériences ultérieures.
Composantes clés de l'étude
Domaine scientifique
- Neurosciences
- Techniques chirurgicales
- Modèles animaux
Contexte
- Les broches crâniennes sont utilisées dans diverses expériences en neurosciences.
- Des techniques chirurgicales appropriées sont cruciales pour le bien-être animal et l'intégrité expérimentale.
- La perméabilité osseuse peut être améliorée afin d'optimiser l'adhérence du ciment.
- Le suivi de la récupération est essentiel après la chirurgie.
Objectif de l'étude
- Démontrer une méthode fiable pour l'implantation d'un support crânien.
- Garantir un inconfort minimal et une récupération rapide pour l'animal.
- Fournir un guide étape par étape aux chercheurs.
Méthodes utilisées
- Anesthésie et préparation de la souris.
- Incision et exposition du crâne.
- Application de l'activateur et du ciment.
- Fixation du support crânien et fermeture de l'incision.
Résultats principaux
- Le headpost a été solidement fixé au crâne.
- La surveillance pendant la récupération a assuré le bien-être de l'animal.
- La méthode s'est révélée efficace pour une utilisation expérimentale future.
- Des complications minimes ont été observées pendant la procédure.
Conclusions
- Cette technique constitue un ajout précieux aux méthodologies de recherche en neurosciences.
- Des pratiques chirurgicales adéquates améliorent la fiabilité des résultats expérimentaux.
- De futures études pourront s'appuyer sur cette méthode pour diverses applications.
Questions fréquemment posées
Pertinence professionnelle pour l'industrie
L'implantation d'un dispositif de fixation crânienne permet un enregistrement et une stimulation neuronaux précis chez les modèles rongeurs, soutenant ainsi la validation de cibles en découverte de médicaments en neurosciences. Cette méthode améliore la qualité des données en réduisant les artefacts liés aux mouvements pendant les tests comportementaux, renforçant la fiabilité prédictive des études précoces d'engagement des cibles. Elle est particulièrement pertinente pour l'élimination des risques mécanistiques associés aux cibles du SNC nécessitant une surveillance neuronale chronique et de haute fidélité.
Applications stratégiques en recherche et développement en biopharmaceutique
Début de la découverte et validation de la cible
- Valeur scientifique : Permet une fixation stable de la tête pour des enregistrements neuronaux longitudinaux lors d'études sur la modulation ciblée.
- Valeur opérationnelle : Assure des conditions expérimentales constantes au cours des séances, réduisant ainsi la variabilité des signaux électrophysiologiques.
Développement de tests et criblage
- Valeur scientifique : Facilite l'intégration avec des dispositifs montés sur la tête pour l'acquisition de signaux neuronaux en temps réel lors d'essais sur des sujets en libre mouvement.
- Valeur opérationnelle : Permet une implantation chronique, autorisant des tests répétés sans nouvelle chirurgie, ce qui améliore le débit des essais.
Recherche translationnelle et préclinique
- Valeur scientifique : Fournit un système pertinent pour évaluer l'engagement ciblé dans les circuits neuronaux sur des périodes prolongées.
- Valeur opérationnelle : Facilite le développement de biomarqueurs translationnels en permettant la corrélation entre l'activité neuronale et les résultats comportementaux.
Intégration des pipelines et des flux de travail
La méthode s'inscrit dans le continuum de découverte allant de la validation de la cible aux tests d'efficacité préclinique, en particulier pour les programmes du SNC nécessitant l'interrogation de circuits neuronaux.
- Biologie de la découverte : Facilite la vérification d'hypothèses en permettant une manipulation et un enregistrement précis des activités neuronales pendant des tâches comportementales.
- Tri : Améliore la préparation des tests en offrant une plateforme stable pour la fixation chronique de dispositifs sur des modèles en libre mouvement.
- Analytique : Produit des données neuronales quantitatives en séries temporelles pouvant être comparées statistiquement entre différents groupes expérimentaux.
- Recherche translationnelle : Établit un lien entre les schémas d'activité neuronale et les phénotypes comportementaux, favorisant l'alignement de biomarqueurs dans les modèles de maladie.
- Réutilisation en entreprise : Constitue une plateforme chirurgicale réutilisable applicable à plusieurs campagnes de validation ciblée.
Impact opérationnel et organisationnel
- Valeur scientifique : Réduit l'ambiguïté mécanistique en permettant une interrogation causale des cibles neuronales chez des animaux en comportement.
- Valeur opérationnelle : Standardise la préparation chirurgicale, améliorant la reproductibilité entre les sites et les opérateurs.
- Valeur stratégique : Accroît la confiance dans les décisions d'aller/arrêt en fournissant des corrélats neuronaux fiables de la modulation ciblée.
- Impact sur le portefeuille : Permet une priorisation ajustée au risque des cibles du SNC fondée sur une validation fonctionnelle dans des comportements éthologiquement pertinents.
Considérations relatives à la mise en œuvre
- Nécessite une expertise en chirurgie stéréotaxique sur rongeurs et en technique aseptique.
- Dépend d'outils chirurgicaux, de ciment dentaire, de résine et de matériaux de suture.
- Exige des protocoles normalisés de surveillance postopératoire afin de garantir le bien-être animal.
- Doit tenir compte de l'épaisseur spécifique au souche du crâne et des variations de cicatrisation.
- Limité par la nécessité de périodes de récupération entre l'implantation et l'expérimentation, ce qui affecte les délais de l'étude.
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Dernière mise à jour : 22 août 2026