Isolement mitochondrial : une technique pour isoler les mitochondries d’un échantillon de tissu cancéreux de l’ovaire humain

Les mitochondries, les organites cytoplasmiques connus sous le nom de centrales électriques de la cellule, subissent des changements structurels et fonctionnels drastiques au cours de la progression du cancer.

Pour isoler les mitochondries, prenez du tissu cancéreux propre dans un plat en verre et coupez-le en petits morceaux. Transférez les morceaux dans un tube contenant un tampon d’isolement mitochondrial. Homogénéiser l’échantillon pour perturber les cellules et libérer leur contenu, y compris les organites.

Centrifugez le mélange à basse vitesse. Cela granule les composants les plus denses comme les noyaux, les débris tissulaires et toutes les cellules intactes, laissant les composants moins denses comme les mitochondries, les microsomes, les peroxysomes et les lysosomes dans le surnageant. Récupérez le surnageant et centrifugez à grande vitesse. Les microsomes, étant relativement plus légers, restent dans le surnageant, tandis que la fraction brute contenant des mitochondries se granule au fond.

Retirez le surnageant et remettez la pastille en suspension dans un milieu à gradient de densité approprié. Mettez en place un gradient de densité discontinu en superposant la fractio