Système de culture proximale : une technique de culture in vitro pour étudier la signalisation paracrine entre les cellules

Dans la signalisation paracrine, les cellules produisent et sécrètent des molécules de signalisation qui induisent des réponses dans les cellules voisines. Pour imiter la signalisation paracrine, commencez par préparer des suspensions unicellulaires de cellules cancéreuses de l’ovaire et de cellules mésothéliales dans leur milieu approprié.

Ensuite, prenez un insert membraneux poreux inversé dans une boîte de culture stérile. Pipetez la suspension de cellules cancéreuses sur la surface inférieure de la membrane d’insertion pour former un dôme liquide. Incuber pour permettre aux cellules de s’installer et de se fixer à la membrane.

Retournez l’insert pour vider le support. Transférez l’insert dans une boîte de culture fraîche contenant un milieu de croissance pour nourrir les cellules cancéreuses qui adhèrent à la surface inférieure de la membrane. Maintenant, ajoutez la suspension de cellules mésothéliales dans le puits d’insertion. Incuber pour permettre aux cellules d’adhérer du côté opposé de la membrane, en empêchant tout contact direct entre les deux types de cellules.

Pendant la culture, les deux types de cellules sécrètent des facteurs de signalisation. Ces molécules diffuse