Isolement des cellules mésothéliales : une technique pour isoler les cellules mésothéliales primaires à partir d’un échantillon de tissu d’épiploon humain

Les cellules mésothéliales primaires humaines, ou HPMC, tapissent de nombreux organes viscéraux comme l’épiploon ou la couche de tissu adipeux présente dans la cavité péritonéale.

Pour isoler les cellules mésothéliales, commencez par immerger un échantillon d’épiploon humain dans un tampon approprié pour éliminer l’excès de globules rouges ou de globules rouges. Ensuite, placez l’épiploon dans un plat en verre et coupez-le en morceaux. Cela dissocie les tissus, libérant des HPMC avec les globules rouges contaminants.

Transférez les morceaux dans un tube conique et laissez-les rester immobiles pendant le temps souhaité. Le tissu haché riche en graisse de faible densité remonte vers le haut, tandis que les composants cellulaires denses se déposent vers le bas. Ensuite, aspirez le liquide au fond, contenant les HPMC et les GR, dans un tube frais.

Centrifugeuse pour collecter les cellules. Retirez le surnageant contenant la mémoire tampon. Remettez la pastille en suspension dans un milieu de croissance mésothélial et incubez pendant la durée souhaitée. Le média facilite la croissance sélective des HPMC par rapport aux GR.

Observez les cellules à l’aide d’un microscope optique pour conf