Encyclopédie des expériences JoVE
Recherche sur le cancer
0 vues • 3:20 min • April 30th, 2023
La cavité péritonéale est l’espace entre la paroi abdominale et la muqueuse des organes internes. Pour une injection intrapéritonéale, commencez par retenir une souris vivante par la région de son cou de sorte que la tête de la souris s’incline vers le bas avec son abdomen ventral exposé.
La contention de la souris restreint ses mouvements et déplace les organes abdominaux vers le diaphragme, évitant ainsi les dommages accidentels aux organes lors de l’insertion de l’aiguille.
Adjacent à la ligne médiane de l’abdomen de la souris, dans le quadrant inférieur droit, localisez un point pour l’insertion de l’aiguille. Ce site permet d’éviter le risque de perforation du cæcum.
Ensuite, prenez une seringue contenant une suspension unicellulaire de cellules cancéreuses de l’ovaire. Insérez l’aiguille à l’endroit choisi à une profondeur d’environ un demi-centimètre pour pénétrer uniquement la paroi abdominale externe. Enfin, injectez lentement la suspension de cellules cancéreuses. Cela garantit une distribution efficace des cellules dans la cavité péritonéale.
Remettez la souris dans sa cage et surveillez-la pour la croissance tumorale. Les tissus de la cavité péritonéale peuvent libérer des molécules chimiotactiques spécifiques qui attirent les cellules cancéreuses, conduisant à leur migration et à leur colonisation, contribuant finalement au développement de la tumeur.
Chargez 500 microlitres de suspension unicellulaire marquée par fluorescence dans la seringue. Ensuite, insérez la seringue dans une aiguille stérile de calibre 25 pour réduire le cisaillement cellulaire avant l’injection. En retenant la souris avec l’autre main, saisissez la souris par la peau du cou et tenez la queue à l’aide de la paume et de l’index. Ensuite, fixez la patte arrière gauche entre l’annulaire et l’auriculaire. Pour éviter de traumatiser les organes abdominaux, retenez bien la souris afin qu’elle ne puisse pas bouger lors de l’injection.
Imaginez une ligne sur l’abdomen et localisez un point sur le côté droit de l’animal et près de la ligne médiane. Le point d’entrée est crânien et légèrement médial du dernier mamelon. Préparez-vous à insérer l’aiguille sur le côté droit de la souris pour éviter le cæcum et réduire le risque de perforation des intestins. Insérez l’aiguille dans la région latérale inférieure de l’abdomen de la souris à une profondeur d’environ 0,5 centimètre. Tirez sur le piston pour confirmer que l’aiguille n’a pas pénétré un vaisseau sanguin ou d’autres organes péritonéaux.
Si aucun liquide n’est aspiré, injecter l’échantillon en utilisant une pression lente et constante. Ensuite, retirez l’aiguille et remettez la souris dans sa cage. Ne pas remettre la seringue avant de la jeter dans le récipient pour objets tranchants.