Inoculation orthotopique de cellules cancéreuses de l’ovaire dans l’ovaire murin : une procédure pour établir un modèle murin de cancer de l’ovaire pour étudier la dissémination péritonéale des cellules

L’inoculation orthotopique permet de délivrer des cellules cancéreuses à un animal receveur dans un tissu ou un site spécifique correspondant à l’emplacement anatomique naturel des cellules. Pour commencer, préparez une souris nue féminine anesthésiée, ventre vers le bas, sur une scène d’opération. Faites une incision verticale près de sa colonne vertébrale à une position entre la cage thoracique et le fémur. Ouvrez les muscles abdominaux pour exposer partiellement la cavité péritonéale. Localisez l’un des ovaires.

Préparez une suspension de cellules cancéreuses de l’ovaire avec une matrice extracellulaire réfrigérée dans une seringue. La basse température empêche la suspension de se solidifier. Injectez cette suspension dans l’ovaire de la souris. Maintenez l’aiguille en place pour permettre à la matrice de se solidifier et d’intégrer les cellules cancéreuses dans l’ovaire. Rétractez l’aiguille. Suturez l’incision pour fermer la plaie. Laissez la souris récupérer.

Au fil du temps, les cellules cancéreuses de l’ovaire injectées prolifèrent pour former une tumeur primaire. Finalement, quelques cellules se détachent de leur emplacement primaire et se disséminent dans la cavité péritonéale. Lorsque ces cellules tumorales migratrices se fixent à la muqueuse de la cavité péritonéale, elles envahissent le tissu péritonéal et prolifèrent pour former des tumeurs secondaires métastasées.

Pour effectuer une inoculation orthotopique, après avoir anesthésié une souris nue femelle de huit semaines selon le protocole textuel, effectuez un pincement des orteils pour vérifier la profondeur de l’anesthésie. Placez la souris anesthésiée sur une platine d’opération, face ventrale vers le bas. Ensuite, désinfectez la zone chirurgicale avec plusieurs lavages à l’aide d’un gommage à base de chlorhexidine et d’alcool.

Ensuite, faites une incision verticale d’environ 2 centimètres près de la colonne vertébrale, entre l’arc costal droit et le fémur. Placez un champ chirurgical stérile autour du site d’incision. Ensuite, fixez les surfaces cutanées incisées à l’aide de pinces pour maintenir l’ouverture.

Maintenant, faites une deuxième incision de 1 centimètre au niveau du péritoine pariétal sous la première incision pour ouvrir la cavité abdominale. Ensuite, clampez les surfaces abdominales incisées. À l’aide d’une pince, coupez le tissu adipeux qui entoure l’ovaire ipsilatéral et la trompe de Fallope pour retirer l’ovaire de la cavité abdominale.

Ensuite, placez soigneusement l’ovaire et la trompe de Fallope sur de la gaze avant de placer la souris, ventre vers le bas, sous le microscope de dissection. Transférez la suspension cellulaire dans une seringue à insuline. Ensuite, injectez immédiatement et soigneusement 1 à 2 microlitres de la suspension cellulaire préparée dans l’ovaire.

Pendant plusieurs secondes, maintenez l’aiguille dans l’ovaire pour vous assurer que l’hydrogel prend. Après la gélification, les cellules tumorales injectées resteront dans l’ovaire. Soigneusement, retournez l’ovaire dans le corps. Avec de la soie médicale stérile, suturez la deuxième incision avant d’utiliser des pinces pour sceller la peau.

• Orthotopic Inoculation - Process of delivering cancer cells to a specific tissue in a recipient animal.
• Ovarian Cancer - A type of cancer that starts in the ovaries of female mammals.
• Ovarian Cancer Cells - Cancerous cells that originate in the ovaries.
• Murine Model - A lab mouse used for experimental purposes.
• Peritoneal Cancer - Cancer that develops in the lining of the abdomen called the peritoneum.

• Introduce Orthotopic Inoculation - Placement of cells in their natural location (e.g., ovary of mouse).
• Key Concepts - Understand the development of ovarian cancer (e.g., tumor inoculation).
• Underlying Mechanisms - Description of how cancer metastasizes (e.g., peritoneal dissemination).
• Connect to Experiment - Contextualize the murine model's role in studying ovarian cancer.

• What is orthotopic inoculation and how does it relate to ovarian cancer cells?
• Why are murine models crucial for understanding ovarian cancer?
• How does peritoneal dissemination contribute to metastasis?

• Describe Practical Applications - Orthotopic inoculation aids in studying cancer (e.g., ovarian tumor).
• Industry Impact - Research impacts oncology and healthcare (e.g., cancer treatment).
• Societal Importance - Advancements may increase survival rates (e.g., improved therapy).
• Link to Scientific Advancements - Discoveries entail new therapeutic technologies.