Dosage des organoïdes de la prostate : une technique de culture ex vivo basée sur un anneau de gel matriciel pour étudier la capacité de différenciation des cellules épithéliales de la prostate

0 vues • 4:16 min • April 30th, 2023

L’épithélium de la prostate comprend principalement des cellules épithéliales basales et des cellules épithéliales luminales. Une monocouche de cellules basales forme la paroi externe de la glande et favorise la survie des cellules luminales. À l’inverse, les cellules luminales tapissent la lumière et sécrètent des protéines spécifiques de la prostate.

Pour étudier la différenciation épithéliale de la prostate ex vivo, il faut commencer par une suspension de cellules épithéliales basales de la prostate. Mélangez la suspension avec une matrice de membrane basale réfrigérée dans le rapport souhaité. Placez ce mélange à côté de la base de la paroi interne d’une plaque de culture répulsive. Faites tourner la plaque pour que le mélange forme un anneau le long de la circonférence du puits.

Incuber la plaque pour permettre à la matrice de se solidifier. Complétez la culture avec un média de prédilection. Les facteurs de croissance dans le milieu favorisent la prolifération des cellules épithéliales basales. Parallèlement, la nature répulsive des cellules de la boîte de culture empêche toute fixation cellulaire, encourageant les cellules à former des sphéroïdes 3D au sein de la matrice.

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